• laboratorium-217043_1280

Cara membersihkan kontaminasi di pabrik sel

Setelah sel tempat kita membiakkannya

pabrik selterkontaminasi, sebagian besar sulit ditangani.Jika sel yang terkontaminasi sangat berharga dan sulit diperoleh kembali, cara berikut dapat digunakan untuk menghilangkannya.

1. Gunakan antibiotik

Antibiotik lebih efektif membunuh bakteri di dalam tubuhpabrik sel.Pengobatan kombinasi lebih efektif dibandingkan pengobatan tunggal.Pengobatan pencegahan lebih efektif daripada pengobatan setelah kontaminasi.Pengobatan pencegahan umumnya menggunakan antibiotik ganda (penisilin 100u/mL ditambah streptomisin 100μg/mL).Setelah kontaminasi, metode pembersihan harus 5 hingga 10 kali lebih banyak dari jumlah biasanya.Obat sebaiknya digunakan selama 24 hingga 48 jam setelah penambahan, dan kemudian diganti dengan rutinitas biasa.Cairan kultur.Metode ini mungkin efektif pada tahap awal kontaminasi.Selain penisilin dan streptomisin, antibiotik yang digunakan juga dapat berupa gentamisin, kanamisin, polimiksin, tetrasiklin, nistatin, dll. Yang umum digunakan adalah 400 hingga 800 μg/mL kanamisin atau 200 μg/mL tetrasiklin.Medianya diganti setiap 2 sampai 3 hari dan diwariskan selama 1 sampai 2 generasi untuk pengobatan.Dalam beberapa tahun terakhir, telah dilaporkan bahwa 4-fluoro, 2-hydroxyquinoline (Ciprofloxacin, Cip), turunan Pleu-romutilin (turunan Pleu-romutilin, BM-Cyclin2: BM-1 dan turunan tetrasiklin (BM-2)) Antibiotik adalah efektif dalam membunuh mikoplasma bila digunakan sendiri atau dalam kombinasi.Ketiga antibiotik ini semuanya disiapkan menjadi larutan pekat 250X dalam PBS dan disimpan pada suhu -20°C untuk digunakan nanti.Konsentrasi penggunaan Cip 10 μg/mL, BM-1 10 μg/mL, dan BM-2 5μg/mL.Bila menggunakan, aspirasi terlebih dahulu media kultur yang terkontaminasi, tambahkan media kultur RPMI1640 yang mengandung BM-1, kemudian aspirasi media kultur setelah 3 hari, tambahkan media kultur RPMI1640 yang mengandung BM-2, dan kultur selama 4 hari, begitu seterusnya selama 3 hari berturut-turut. .putaran, sampai dibuktikan dengan mikroskop pewarnaan fluoresen 33258 bahwa mikoplasma telah dihilangkan, kemudian media kultur normal ditambahkan untuk kultur dan dipass 3-4 kali.

Cara membersihkan kontaminasi di pabrik sel1

2. Perawatan pemanasan

Menginkubasi kultur jaringan yang terkontaminasi pada suhu 41°C selama 18 jam dapat membunuh mikoplasma, namun memiliki efek buruk pada sel.Oleh karena itu, uji pendahuluan harus dilakukan sebelum pengobatan untuk mengetahui waktu pemanasan yang dapat membunuh mikoplasma secara maksimal dan berdampak paling kecil pada sel.Cara ini terkadang tidak bisa diandalkan.Jika diobati dengan obat terlebih dahulu lalu dipanaskan pada suhu 41°C, efeknya akan lebih baik.

3. Gunakan serum khusus mikoplasma

Kontaminasi mikoplasma dapat dihilangkan dengan serum imun mikoplasma kelinci 5% (titer hemaglutinasi 1:320 atau lebih).Karena antibodi spesifik dapat menghambat pertumbuhan mikoplasma, hasilnya menjadi negatif 11 hari setelah pengobatan antiserum dan tetap negatif 5 bulan kemudian.negatif.Namun cara ini lebih merepotkan dan tidak senyaman dan ekonomis seperti penggunaan antibiotik.

4. Metode lainnya

Selain metode menghilangkan kontaminasi yang disebutkan di atas, ada juga metode inokulasi dan sterilisasi pada hewan, metode fagositosis makrofag, metode penambahan bromourasil ke dalam hewan yang terkontaminasi.botol budayadan kemudian menyinarinya dengan cahaya, dan metode penyaringan, dll., tetapi semuanya lebih merepotkan dan tidak efektif.Oleh karena itu, ketika kontaminasi mikoplasma terjadi, kecuali jika mempunyai nilai yang sangat penting, biasanya akan dibuang dan dikultur kembali.

silakan hubungi Whatsapp & WeChat : +86 180 8048 1709


Waktu posting: 24 Oktober 2023